【摘 要】
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目的设计合成PCV2 CAP的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法采用DNAStar和BcePred分析软件并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测PCV2 CAP的B细胞表位,以此合成4分支多重
【机 构】
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重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆市动物疫病预防控制中心,第三军医大学全军免疫学研究所,
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目的设计合成PCV2 CAP的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法采用DNAStar和BcePred分析软件并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测PCV2 CAP的B细胞表位,以此合成4分支多重抗原肽结构,同时串联一个通用型Th表位;采用Fmoc法合成4分支PCV2 CAP多重抗原肽(MAP),通过高效反相液相色谱(RP-HPLC)、质谱(MS)分析对其进行初步鉴定。以合成的抗原肽免疫昆明系小鼠及兔,观察体液免疫反应。结果初步筛选出3种抗原指数较高的表位,即98~103aa(命名为B98),156~162aa(命名为B156),228~233aa(命名为B228);合成的多重抗原肽经RP-HPLC层析后,纯度达到92.49%,MS鉴定其相对分子质量一致,误差小于0.1%。以合成的MAP疫苗免疫小鼠及兔后,可产生高滴度的特异性抗PCV2 CAP抗体。结论 PCV2 CAP的B细胞新表位多重抗原肽有免疫原作用,将为PCV2 CAP表位肽疫苗的研究奠定基础。
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