【摘 要】
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目的 :探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因的表达对骨肉瘤MG-63细胞凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法 :将靶向COX
【机 构】
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兰州大学第二医院骨科,甘肃省骨关节疾病研究重点实验室;
【基金项目】
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甘肃省自然科学基金资助项目(编号:1010RJZA124)
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目的 :探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因的表达对骨肉瘤MG-63细胞凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法 :将靶向COX-2基因的siRNA(COX-2siRNA)转染至骨肉瘤MG-63细胞后,FCM法检测其对细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR法检测细胞中COX-2、Bcl-2、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和Beclin 1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测COX-2、Bcl-2和Beclin 1蛋白的表达。结果 :COX-2 siRNA转染组MG-63细胞中COX-2 mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性对照组(转染control siRNA)和空白对照组(未转染的MG-63细胞)(P<0.05)。COX-2 siRNA转染组MG-63细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。COX-2siRNA转染组MG-63细胞中抗凋亡因子Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平下调(P<0.05),自噬相关因子LC3和Beclin 1 mRNA及Beclin 1蛋白的表达水平上调(P<0.05)。结论 :沉默COX-2基因可以促进骨肉瘤MG-63细胞的凋亡和自噬。
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