【摘 要】
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目的 探讨聚合酶链反应结合反向线点杂交(PCR/RLB)技术在检测和鉴定真菌性鼻窦炎(FS)常见致病曲霉菌中应用的可行性.方法 收集首都医科大学附属北京同仁医院2009年5月至201
【机 构】
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北京大学第一医院皮肤科, 首都医科大学附属北京同仁医院病理科
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目的 探讨聚合酶链反应结合反向线点杂交(PCR/RLB)技术在检测和鉴定真菌性鼻窦炎(FS)常见致病曲霉菌中应用的可行性.方法 收集首都医科大学附属北京同仁医院2009年5月至2010年2月住院手术的FS患者活检石蜡包埋组织26例和活检新鲜组织8例,全部病例进行了病理学真菌检查、真菌培养及真菌ITS2区测序；提取各标本中真菌的DNA,用真菌特异性引物行PCR扩增,针对真菌的ITS2区设计曲霉菌种特异性探针,用5根曲霉菌种特异性探针与PCR产物进行反向线点杂交；将PCR/RLB与ITS2区测序、真菌培养及病理学检查的结果进行比较.阳性对照为5株曲霉菌株,阴性对照为真菌培养为非曲霉的石蜡包埋组织.结果 活检标本病理学检查均可见菌丝；真菌培养14例阳性(41.2％)；测序16例(47.1％)得到结果；PCR/RLB鉴定34例均得出鉴定结果:黄曲霉14例,烟曲霉10例,黑曲霉4例,构巢曲霉1例,黄曲霉和烟曲霉同时阳性3例,烟曲霉与黑曲霉同时阳性2例.结论 PCR/RLB技术可以对FS常见致病曲霉菌进行检测及鉴定,与病理组织学检查、真菌培养及DNA测序方法相比较,具有经济省时、敏感性高、特异性强、高通量等优势.
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