【摘 要】
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目的 构建具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于转导基因的可控性表达.方法 合成各种缺氧应答基因的缺氧应答元件(HRE)寡核苷酸序列,与巨细胞病毒(
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目的 构建具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于转导基因的可控性表达.方法 合成各种缺氧应答基因的缺氧应答元件(HRE)寡核苷酸序列,与巨细胞病毒(CMV)启动子组合,驱动荧光素酶报告基因和治疗基因人红细胞生成素(hEPO)的转录.检测荧光素酶的活性和hEPO的表达以确定其缺氧转录活性.结果 在各种缺氧调控载体中,由鼠磷酸甘油酸激酶(mPGK)的HRE与CMV启动子组合而成的缺氧应答启动子显示出高缺氧应答性,而且缺氧诱导的表达水平与完整的CMV启动子在常氧环境下的转录水平相近.结论 3HRE/mPGK/CMV缺氧调控载体对于实现治疗基因的精确调控表达可能非常有用.
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