【摘 要】
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目的 研究大鼠脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSC)及糖氧剥夺下,细胞自噬和对诱导分化成脂的影响.方法 常规制备ADSC,设置对照组(G组)、少糖组(SG组)、缺氧组(G+CoCl2组)、缺氧少糖组(SG+CoCl2组)和自噬阳性对照组(EBSS组).设置不同培养时间,MTT检测各组ADSC存活情况;Western blot分析细胞自噬及成脂诱导油红“O”染色与比色.结果 不同培养时间,ADSC细胞均可增殖.培养24 h,各组细胞之间无差别(P>0.05),但培养48
【机 构】
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无锡卫生高等职业技术学校,无锡 214028;杭州师范大学医学院,杭州 311121
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目的 研究大鼠脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSC)及糖氧剥夺下,细胞自噬和对诱导分化成脂的影响.方法 常规制备ADSC,设置对照组(G组)、少糖组(SG组)、缺氧组(G+CoCl2组)、缺氧少糖组(SG+CoCl2组)和自噬阳性对照组(EBSS组).设置不同培养时间,MTT检测各组ADSC存活情况;Western blot分析细胞自噬及成脂诱导油红“O”染色与比色.结果 不同培养时间,ADSC细胞均可增殖.培养24 h,各组细胞之间无差别(P>0.05),但培养48 h和72 h,G组细胞增殖明显高于其它三组(SG组、G+CoCl2组和SG+CoCl2组),P<0.05;Western blot分析,EBSS组、G组和SG组的自噬相关蛋白Ⅰ型(LC3-Ⅰ)明显弱于自噬相关蛋白Ⅱ型(LC3-Ⅱ),且G+CoCl2组和SG+CoCl2组的LC3-Ⅰ明显高于EBSS组;成脂诱导实验中,G组油红“O”比色值最高,与其它组比较均有统计学差异(P<0.05).结论 ADSC具有较强的细胞自噬作用,推测在缺糖缺氧条件下,通过抑制细胞自噬,降低ADSC存活率以及诱导分化成脂率.
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