2 450 MHz微波辐射对原代培养的小鼠成纤维细胞增殖活性的影响及其分子机制研究

来源 :中华物理医学与康复杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:remine
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目的 探讨2 450 MHz微波辐射对原代培养的小鼠皮肤成纤维细胞增殖活性的影响,进而分析微波辐射后成纤维细胞的基因及蛋白的变化.方法 小鼠成纤维细胞体外经不同功率密度,频率为2 450 MHz的微波直接辐射不同时间后,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法测定成纤维细胞的生长代谢情况,用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Real-time PCR扩增的方法分析微波辐射对细胞前胶原Ⅰ型和Ⅲ型mRNA表达水平的影响;采用抗磷酸化形式的细胞外调节蛋白激酶(ERK)抗体,通过免疫荧光染色方法观察微波辐射后小鼠皮肤成纤维细胞蛋白质磷酸化情况.结果 ①成纤维细胞经不同功率密度(分别为0.5,1和5 W/cm2)和不同时间(分别为5,15和30 min)微波辐射后,其生长代谢曲线随时间延长而下降.功率密度为0.5 W/cm2和1 W/cm2的微波分别辐射5 min、15 min和30 min,其成纤维细胞活性与对照组相比,差异无统汁学意义(P>0.05).功率密度为5 W/cm2的微波辐射5 min以上,可抑制体外培养的正常皮肤成纤维细胞的增殖功能,成纤维细胞活性较对照组明显降低(P<0.05).②功率密度为5 W/cm2的微波辐射5 min,G0/G1期细胞所占比例明显升高(P<0.05),且磷酸化ERK1/2表达水平明显升高.③微波辐射对前胶原Ⅰ型基因mRNA表达的抑制作用随时间的延长而增强,功率密度为1 W/cm2的微波辐射30 min、功率密度为5 W/cm2的微波辐射5 min以上时,能显著抑制前胶原Ⅰ型基因mRNA的表达(P<0.05),并且显著下调前胶原Ⅰ型与Ⅲ型基因mRNA的比率(P<0.05).结论 体外短时间高强度微波辐射,能降低小鼠成纤维细胞的增殖活性,可阻断成纤维细胞周期,并使细胞停滞于G0/G1期.微波对成纤维细胞的增殖及其胶原产生的某些相关基因的表达具有直接的抑制作用,且与辐射强度及时间有关.微波辐射可激活皮肤成纤维细胞磷酸化ERK1/2信号转导通路,提示微波辐射导致的成纤维细胞损伤可能是通过MAPK信号转导通路的激活而实现的。

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