【摘 要】
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目的:探讨PI3K/Akt通路与肝癌对索拉非尼获得性耐药机制的关系。方法:采用浓度梯度递增法建立肝癌细胞系Hep G2和Huh7耐药细胞株Hep G2-SR和Huh7-SR,并采用CCK-8法检测细胞活
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第四医院普外科,哈尔滨医科大学附属第一医院普外科,富裕县人民医院普外科
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目的:探讨PI3K/Akt通路与肝癌对索拉非尼获得性耐药机制的关系。方法:采用浓度梯度递增法建立肝癌细胞系Hep G2和Huh7耐药细胞株Hep G2-SR和Huh7-SR,并采用CCK-8法检测细胞活力,验证细胞耐药特性。Western blot检测p-Akt、Akt和β-actin蛋白表达水平。以哌立福辛抑制p-Akt,采用CCK-8法检测细胞活力,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡,探讨哌立福辛与索拉非尼的协同作用及对耐药的逆转作用。结果:索拉非尼对Huh7及Hep G2细胞抑制细胞活力的作用明显强于Huh7-SR、Hep G2-SR细胞(P<0.05)。耐药细胞株中Akt磷酸化蛋白p-Akt的表达水平明显高于亲本细胞株(P<0.05),而Akt表达在耐药株与亲本细胞株中无明显差异(P>0.05)。哌立福辛可协同索拉非尼抑制Huh7-SR、Hep G2-SR细胞活力,促进凋亡。结论:索拉非尼持续作用导致PI3K/Akt通路的激活导致肝癌对索拉非尼获得性耐药,其机制是通过调节发生在翻译后水平的Akt磷酸化而非Akt转录或翻译。抑制Akt可逆转肝癌对索拉非尼耐药。
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