【摘 要】
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目的 探讨低频超声对细胞基因转染的作用.方法 超声治疗仪频率1 MHz,脉冲重复频率100Hz,占空系数20%.质粒DNA为含编码绿荧光蛋白的pEGFP.应用荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞
【机 构】
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武汉,Department of Imaging
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目的 探讨低频超声对细胞基因转染的作用.方法 超声治疗仪频率1 MHz,脉冲重复频率100Hz,占空系数20%.质粒DNA为含编码绿荧光蛋白的pEGFP.应用荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞基因转染率,台盼蓝染色计算细胞成活率.选用C2C12、3T3-MDEI和CHO 3种细胞系为研究对象,加入DNA后辐照不同声强、时间或加入超声造影剂,观察各条件下的细胞基因转染率和成活率.结果 ①超声介导的基因转染与声强和辐射时间有关,最佳剂量为1 W/cm2 20 s;②同样超声剂量,较高的声强较早达到最大基因转染率;③较低剂量时,微泡造影剂可使超声介导的基因转染提高2～3倍并可显著提高最高基因转染率.结论 低频超声可介导细胞基因转染,基因转染率不但与超声辐射剂量有关,而且同样剂量时,高声强较早达到最大基因转染率,最佳剂量是1 W/cm2 20 s.同时,微泡造影剂可提高超声介导基因转染的最高转染率.
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