肺炎衣原体CPn0308的基因克隆及其内源性蛋白定位的研究

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目的克隆肺炎衣原体基因CPn0308,表达融合蛋白,并制备抗体对其表达的内源性蛋白进行初步定位。方法根据STD基因库提供的信息设计引物,聚合酶链反应(PCR)克隆目的基因,用BamHI/NotI对克隆的目的基因和pGEX-6P2载体进行酶切,T4连接酶连接后,重组质粒经42℃转化XLl-blue细菌;用PCR进行初步筛选,交叉PCR对提取质粒进一步确定。最后对插入片断进行序列分析;用IPTG诱导阳性克隆的细菌使其表达GST融合蛋白,纯化后免疫小鼠制备抗体,使用IFA对内源性蛋白进行定位分析。结果克隆出肺炎
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