钠通道SCN1A基因短发夹RNA表达质粒的构建及其在HEK293细胞中的沉默效果

来源 :南华大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：huyuexing

【摘要】

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目的采用人SCN1A基因非保守区DNA构建短发夹RNA（shRNA）稳定表达的重组质粒,在HEK293细胞中抑制SCN1A基因表达。方法PCR分别正反向扩增SCN1A基因特异序列,构建成一个绿色光蛋白（G

【作者】

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龙跃生孙卫文赵绮华曾涛廖卫平

【机构】

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广州医学院第二附属医院神经科学研究所

【出处】

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南华大学学报：医学版

【发表日期】

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2009年3期

【关键词】

：

RNA干扰钠通道癫痫 RNA interference sodium channel epilepsy

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（编号：30600198）,广东省自然科学基金项目（编号：06301101）.

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目的采用人SCN1A基因非保守区DNA构建短发夹RNA（shRNA）稳定表达的重组质粒,在HEK293细胞中抑制SCN1A基因表达。方法PCR分别正反向扩增SCN1A基因特异序列,构建成一个绿色光蛋白（GFP）与发夹结构RNA（shRNA）融合表达的重组质粒pEGFP-SCN1A-shRNA;该质粒和对照质粒（pCMV-EGFP）分别与SCN1A基因表达质粒（pCMV-SCN1A）共转染HEK293细胞株,采用半定量RT-PCR及双荧光共定位法鉴定SCN1A基因的表达情况。结果与对照相比较,shRNA表达

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