诺如病毒常见流行株胶体金免疫层析快速检测方法

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zql0913
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[背景]诺如病毒是全球引发急性胃肠炎的最主要病原之一,具有丰富的遗传多样性.[目的]建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法.[方法]将抗诺如病毒衣壳蛋白的单克隆抗体1Bl0作为金标抗体、抗诺如病毒衣壳蛋白的单克隆抗体1D6作为检测线、羊抗鼠抗体作为质控线组装成胶体金试纸条.对试纸条的组装条件进行优化,确定最佳标记pH、金标抗体最佳浓缩比例及检测线(test line,T线)、质控线(control line,C线)最佳划线浓度等.对新方法进行性能评价,包括灵敏性试验、特异性试验、保存期试验及符合率实验等.[结果]所建立的诺如病毒胶体金试纸条检测方法最低检测浓度为5.9× 105 copies/μL.本方法与常见的腹泻病毒,如轮状病毒、星状病毒、腺病毒、肠道病毒均无交叉反应.批次间与批次内重复较好,保存期试验表明试纸条至少可以室温密封干燥保存一年时间.应用所建立的胶体金检测方法对24份临床粪便样本进行检测,检测结果与实时荧光RT-PCR方法的阳性符合率约为83% (15/18),常见流行株GⅡ.2型、GⅡ.4型、GⅡ.17型均被成功检出.[结论]建立的胶体金试纸条检测方法具有较好的特异性与稳定性,可用于诺如病毒常见流行株检测及大规模流行病学调查.
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