TRIP13基因mRNA在慢性淋巴细胞白血病B淋巴细胞的表达及其调控JVM-2细胞增殖和凋亡的分子机制探讨

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pankerong
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目的

探讨甲状腺激素受体相互作用分子13(TRIP13)基因表达和慢性淋巴细胞白血病(CLL)的相关性,验证TRIP13基因在CLL发生发展中发挥的生物学功能,探讨TRIP13基因调控CLL发生发展的下游分子机制。

方法

①应用实时荧光定量PCR检测30例CLL患者和12名造血干细胞供者(正常对照组)外周血CD19+ B淋巴细胞TRIP13 mRNA的表达水平。②使用慢病毒介导的shRNA干扰JVM-2细胞TRIP13 mRNA和蛋白表达水平,同时使用随机序列shRNA处理JVM-2细胞作为对照组,分别应用MTT法和流式细胞术检测TRIP13干扰组、对照组JVM-2细胞的增殖和凋亡情况。③Western blot法检测TRIP13干扰对JVM-2细胞凋亡相关蛋白表达的影响。

结果

①30例CLL患者外周血B淋巴细胞TRIP13 mRNA表达水平(2-△Ct= 0.014 89)高于正常对照组(2-△Ct= 0.000 19)(P<0.001)。②在JVM2细胞中筛选出有效干扰shRNA靶点,下调TRIP13的表达能够有效抑制JVM-2细胞增殖并促进细胞凋亡。③干扰TRIP13后JVM-2细胞Myc和Bcl-2蛋白表达下调(P<0.001),Bax、caspase3、Bad蛋白表达上调(P<0.001)。

结论

CLL患者外周血CD19+ B淋巴细胞TRIP13 mRNA表达上调;TRIP13基因通过影响细胞增殖和凋亡相关蛋白表达而调控JVM2细胞的增殖与凋亡。

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