人CD23基因的扩增及其在HEK293T细胞的高效表达

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaobangzi

【摘要】

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目的建立一个有效表达CD23的系统。方法采用RT-PCR方法，从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23cDNA基因，并将其克隆到真核表达载体pcDNA3．1B上，构建成pcDNA3．1／CD23质粒表达载体；将pcDNA3．1

【作者】

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李秀锦仲峰付志强范绍瑛李轶刘俊乐仲飞

【机构】

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燕山大学环境与化学工程学院生物工程系,张家口老虎头煤矿职工医院,秦皇岛市第一人民医院耳鼻喉科,秦皇岛市中心血站

【出处】

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基础医学与临床

【发表日期】

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2007年5期

【关键词】

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CD23 HEK293T细胞表达 WESTERN BLOT 流式细胞分析 CD23 HEK293T cells expression Western

【基金项目】

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致谢：本文得到新加坡国立大学医学院王德云博士的大力支持,在此表示衷心感谢!

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目的建立一个有效表达CD23的系统。方法采用RT-PCR方法，从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23cDNA基因，并将其克隆到真核表达载体pcDNA3．1B上，构建成pcDNA3．1／CD23质粒表达载体；将pcDNA3．1／CD23质粒转染HEK293T细胞，通过流式细胞仪和Westernblot检测CD23在细胞中的表达情况。结果扩增的CD23 cDNA序列与文献报道的一致；通过构建表达载体和转染细胞实现了CD23 cDNA在293T细胞膜上的表达。转染效率达80％以上，并获得了较高水平的表达。结论扩增C

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