【摘 要】
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利用斑马鱼模型评价防风多糖的免疫调节作用，并利用转录组测序和实时荧光定量PCR技术探讨其作用机制。以免疫细胞荧光标记的转基因斑马鱼Tg（lyz: DsRed）为实验动物，选用长春瑞滨诱导免疫低下模型，评价防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞密度和分布的影响。以野生型AB系斑马鱼为实验动物，采用中性红和苏丹黑B染色法，检测防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞和中性粒细胞数目的影响；采用DAF-FM DA荧光探针法，
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（82074283）；
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利用斑马鱼模型评价防风多糖的免疫调节作用，并利用转录组测序和实时荧光定量PCR技术探讨其作用机制。以免疫细胞荧光标记的转基因斑马鱼Tg（lyz: DsRed）为实验动物，选用长春瑞滨诱导免疫低下模型，评价防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞密度和分布的影响。以野生型AB系斑马鱼为实验动物，采用中性红和苏丹黑B染色法，检测防风多糖对斑马鱼体内巨噬细胞和中性粒细胞数目的影响；采用DAF-FM DA荧光探针法，检测各组斑马鱼体内NO含量的变化；ELISA法检测斑马鱼体内IL-1β和IL-6的含量变化。利用转录组测序分析空白对照组、模型组和防风多糖处理组斑马鱼的差异表达基因，通过Gene Ontology（GO）和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）富集分析其免疫调节作用机制，并利用RT-qPCR法验证关键基因的表达水平。结果显示，防风多糖能显著增加斑马鱼免疫细胞密度，增加巨噬细胞和中性粒细胞数目，并降低免疫低下斑马鱼体内NO、IL-1β和IL-6含量。转录组测序分析结果显示防风多糖通过影响Toll样受体通路和单纯疱疹感染通路上免疫相关基因的表达水平，进而影响下游的细胞因子以及干扰素的释放，完成T细胞的活化过程，发挥调节机体免疫活性的作用。
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