亚溶量 C5 b-9可诱导足细胞的保护性自噬应答

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongmaomi
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目的:通过亚溶量补体C5b-9(sC5b-9)攻击足细胞的离体模型,探讨自噬在免疫介导足细胞损伤过程中的作用。方法:建立sC5b-9攻击足细胞体外模型,采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色标记自噬泡,瑞氏-吉姆萨染色光镜下观察细胞形态,免疫荧光检测nephrin的表达及分布,Western blotting 检测LC3-II和LC3-I的表达,MTT法检测细胞存活率,Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果:成功建立sC5b-9攻击足细胞体外模型,将细胞溶破率≤5%定义为亚溶量攻击。 MDC染色和自噬标志LC3-II的检测均显示造模后48 h足细胞的自噬活动明显活跃。抑制自噬可明显加重sC5b-9所致的足细胞形态异常。 sC5b-9攻击可使足细胞nephrin的表达量明显减少,并且异常分布,而抑制自噬可进一步下调nephrin的表达。抑制自噬可促进sC5b-9所诱导的足细胞凋亡。结论:sC5b-9可直接诱导足细胞自噬活动增强,而自噬则在sC5b-9介导的足细胞损伤过程中发挥着保护作用。
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