【摘 要】
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开发了两步亲和色谱法:肝素-琼脂糖凝胶、Ni-琼脂糖凝胶色谱纯化人血浆中硒蛋白-P的方法,并采用氢化物发生-原子荧光分光光度法( HG - AFS)检测,成功搭建了硒蛋白-p的纯化检
【机 构】
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天津大学药物科学与技术学院天津市现代药物传递及功能高效化重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金;天津大学自主创新基金资助项目
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开发了两步亲和色谱法:肝素-琼脂糖凝胶、Ni-琼脂糖凝胶色谱纯化人血浆中硒蛋白-P的方法,并采用氢化物发生-原子荧光分光光度法( HG - AFS)检测,成功搭建了硒蛋白-p的纯化检测平台.确定了亲和色谱纯化的最佳梯度洗脱条件,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS - PAGE)定性检测,得到了一定纯度的硒蛋白-P,其回收率达43.2％.HG - AFS方法的线性相关系数为0.9991,检出限为0.09 μg/L,日内精密度(RSD)为0.12％,日间精密度(RSD)为0.27％,加标回收率为95％～104％.该亲和色谱纯化方法简单易控、回收率高,HG - AFS检测灵敏度高,结果准确可靠.
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