【摘 要】
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[目的]研究棒曲霉素扩张青霉菌(Penicillium expansum)的快速和特异性PCR检测方法.[方法]通过P,expansum的纯茵平板和液体培养以及纯菌接种于苹果、苹果果肉和苹果汁,用Cenis
【机 构】
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西北农林科技大学食品科学与工程学院,Canadian Research Institute for Food Safety and Food Science Department
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[目的]研究棒曲霉素扩张青霉菌(Penicillium expansum)的快速和特异性PCR检测方法.[方法]通过P,expansum的纯茵平板和液体培养以及纯菌接种于苹果、苹果果肉和苹果汁,用Cenis改良方法提取DNA,以基于isoepoxydon dehydrogenase和polygatacturonase编码基因的两对引物扩增P,expansum DNA,建立特异和快速的检测P.expansum的方法.[结果]基于polygatacturonase基因的引物具有很强的特异性,只有目标DNA片段被扩增,而基于isoepoxydon dehydrogenase基因的引物扩增特异性较差.纯培养可以检测到5×10-6μg DNA/每反应体系,整个检测时间约为5 h,比传统培养法(4～6 d)时间大大缩短.苹果、苹果果肉和果汁接种纯P.expansum后所提DNA都得到了很好的扩增,具有很高的特异性,不受苹果样品DNA的干扰.[结论]本研究建立的P.expansum的PCR检测方法特异、快速、灵敏,可用于商品果汁和苹果汁工业化生产中P.expansum的快速检测和质量控制,也可用于工艺过程对P.expansum污染的快速溯源.
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