CYP1A1基因cDNA全长的T载体克隆及序列分析

来源 :毒理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lionschen2009
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目的构建含KpnI、XhoI双酶切位点的人细胞色素(CYP1A1)基因cDNA全长的pGEM—T载体,为以后的亚克隆和毒理学研究提供实验材料。方法从培养的人乳腺癌细胞(MCF-7)中抽提总RNA,RT—PCR扩增CYP1A1基因cDNA全长,与pGEM—T载体连接后转化DH5a,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行测序分析。结果重组质粒pGEM—T-1A1 PCR后获得了1568bp产物,酶切鉴定证实目的片段成功插入至pGEM-T,测序分析也进一步证明了目的片段与GeneBank中CYP
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