【摘 要】
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目的构建鼠源绿色荧光蛋白-重组人血管非炎性因子1基因(GFP-VNN1)重组质粒,并观察其对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子分泌及细胞凋亡的影响。方法从RAW264.7细胞中获得总RNA,
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院药剂科,安徽医科大学药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:81770609)
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目的构建鼠源绿色荧光蛋白-重组人血管非炎性因子1基因(GFP-VNN1)重组质粒,并观察其对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子分泌及细胞凋亡的影响。方法从RAW264.7细胞中获得总RNA,逆转录得到cDNA,用HindⅢ和BamHⅠ限制性内切酶双酶切后连接至绿色荧光蛋白(GFP)载体上。表达载体经限制性内切酶酶切和DNA序列分析正确后转染至RAW264.7细胞中,ELISA试剂盒及Western blot法检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)分泌,流式细胞术检测细胞凋
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