【摘 要】
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为进一步改造细胞色素P450BM-3酶对吲哚的羟基化能力,以P450BM-3结构与功能关系的推测为指导,选择突变酶P450BM-3（A74G/F87V/L188Q/E435T）为父本,在可能影响P450BM-3催化吲哚羟
【机 构】
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浙江大学材料与化学工程学院,浙江大学宁波理工学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30570411,20876143）.致谢：感谢德国斯图加特大学Schmid教授惠赠质粒pET28a（＋）-P450BM-3（A74G/F87V/L188Q）.
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为进一步改造细胞色素P450BM-3酶对吲哚的羟基化能力,以P450BM-3结构与功能关系的推测为指导,选择突变酶P450BM-3（A74G/F87V/L188Q/E435T）为父本,在可能影响P450BM-3催化吲哚羟基化区域选择性的D168位点进行定点饱和突变,根据全细胞催化产物颜色及组成进行筛选,得到了产物组成、酶动力学性质与父本不同的两个突变酶。突变酶D168W的吲哚羟基化产物中90%是靛玉红,而另一个突变酶D168R的产物中87%是靛蓝,产物组成均不同于亲本。在催化吲哚羟基化时,D168W的kc
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