花椰菜最适ISSR反应体系的建立及优化

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以花椰菜9901A×9908杂交种为材料,用高盐低pH值法提取的基因组DNA为模板,时ISSR-PCR反应体系中的铗离子浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶量、引物用量以及最适退火温度等影响因子进行了优化和筛选。建立了适合花椰菜的ISSR反应体系:20μL PCR反应体系,含10×PCR反应缓冲液2μL,2.0mmol/L MgCl2,4×dNTP混合物0.2mmol/L,引物0.5μmol/L,Taq酶1.5U,基因组DNA约30ng,最适退火温度为52.8℃。
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