杨梅RAPD-PCR体系的正交优化研究

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【摘要】

：

以杨梅DNA为模板，对影响杨梅RAPD-PCR扩增的重要参数进行了优化试验，以期建立杨梅RAPD反应的最佳体系。通过采用正交试验设计的方法，对杨梅RAPD-PCR条件进行了优化，结果表明最佳

【作者】

：

高燕会朱玉球黄华宏张雷凡童再康

【机构】

：

浙江林学院林业与生物技术学院

【出处】

：

生物技术

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

杨梅 RAPD 体系优化正交设计 Myrica rubra RAPD system optimization orthogonal design

【基金项目】

：

浙江省科技厅重大项目资助（“杨梅、香榧、山核桃等特色经济林木遗传改良及示范”,21102537）

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以杨梅DNA为模板，对影响杨梅RAPD-PCR扩增的重要参数进行了优化试验，以期建立杨梅RAPD反应的最佳体系。通过采用正交试验设计的方法，对杨梅RAPD-PCR条件进行了优化，结果表明最佳的杨梅RAPD-PCR的反应体系（20μl）中含有1×buffer，1．0U TaqDNA聚合酶，3．0mmol／L MgCl2，0．30mmol／L dNIPs，1．5μmol／L引物和模板DNA 30-40ng。适宜的扩增条件为94℃预变性3min，再进入38个PCR循环（94℃变性30s，38℃退火30

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