日本扁柏核基因组微卫星的分离与鉴定

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【摘要】

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以日本扁柏4个种源的DNA样品为材料,经NdeⅡ酶切并电泳后回收300～1000 bp DNA片段,与含有生物素标记的(CT)15探针杂交,再用磁珠(DynabeadsR M280 streptavitin beads)固定杂交

【作者】

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李新国田金菊谷尚树津村义彦

【机构】

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北京林业大学生物技术系,北京林业大学林业科技股份公司,日本森林综合研究所基因组分析实验室

【出处】

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遗传学报

【发表日期】

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2004年4期

【关键词】

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日本扁柏微卫星基因组测序 Chamaecypress obtuse microsatellites genomics sequencing

【基金项目】

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日本科技厅(STA)资助项目

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以日本扁柏4个种源的DNA样品为材料,经NdeⅡ酶切并电泳后回收300～1000 bp DNA片段,与含有生物素标记的(CT)15探针杂交,再用磁珠(DynabeadsR M280 streptavitin beads)固定杂交产物,成功地实现了日本扁柏核基因组微卫星的高效分离.以pUC118 BamH I/BAP为载体,E.coli为寄主,构建了日本扁柏2个富含微卫星的基因组文库,共获得2200多个阳性克隆.从构建的基因组文库中,随机挑选480个阳性克隆进行测序,发现含有微卫星的克隆比例高达65.6%,

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