【摘 要】
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为培育转基因抗马铃薯卷叶病毒的新材料,采用二次连接法将存在于克隆载体pLR56中的马铃薯卷叶病毒56KD蛋白基因及3端非编码区构建到双元载体系统的中间表达载体质粒pROKⅡ
【机 构】
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东北农业大学农学院,黑龙江,哈尔滨,150030
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为培育转基因抗马铃薯卷叶病毒的新材料,采用二次连接法将存在于克隆载体pLR56中的马铃薯卷叶病毒56KD蛋白基因及3端非编码区构建到双元载体系统的中间表达载体质粒pROKⅡ中,采用三亲融合法和直接导入法转化根癌农杆菌LBA4404,PCR法检测.实验表明,二次连接法效果优于一次连接法,两种连接法对比,二次连接法更适用于大分子质粒的重组.直接导入法比三亲融合法更简便,二者转化效率没有显著差异.实验构建完成马铃薯卷叶病毒56KD蛋白基因及3端非编码植物转化载体,建立了高效、简便的植物转化载体的构建方法.
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