【摘 要】
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目的观察caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法取培养第3代VSMCs培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)(5 mmol/L,DMEM配
【机 构】
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第三军医大学新桥医院神经外科,全军癫痫病诊治中心,
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目的观察caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法取培养第3代VSMCs培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)(5 mmol/L,DMEM配置)作用2 h;对照组加入与MβCD等量的DMEM作用2 h后以DMEM冲洗3次后正常培养48 h。采集细胞进行RT-PCR检测Caveolin-1、pSmad2 mRNA表达变化,Western blot法检测Caveolin-1、pSmad2蛋白表达变化,免疫组化检测Caveolin-1、TGF-β受体1(TGF-βR1)在细胞中的表达分布,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果 Caveolin-1在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显下降(P<0.01),并且以细胞膜和细胞质高表达为主;而Smad2在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显上升,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);并且TβR-1在MβCD干扰后细胞内表达增加。CCK-8检测结果显示,MβCD干扰后,VSMCs增殖被显著抑制(P<0.01)。结论破坏caveolae结构后可以抑制VSMCs的增殖,其可能的机制是caveolae被破坏后,TGF-β/Smad信号通路增强,不能抑制Smad2磷酸化和下游的信号转导,从而达到抑制VSMCs的增殖的作用。
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