【摘 要】
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根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病
【机 构】
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汕头出入境检验检疫局,广东出入境检验检疫局,罗氏诊断产品有限公司广州办事处
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根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经6h增菌,检测的灵敏度可低于10cfu/25g;对48株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%。应用本法检测人工染菌样品和进出口水产品样品,结果与SN标准方法检测结果一致。本法可在8h内完成对水产品中上述三种致病菌的定性或定量检测,可适应于进出口水产品的快速检验。
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