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译自International Hatchery Practice，Vol. 29（2015），№5：12～13
邵建忠 校 韩浩月 制图表
中图分类号：S851 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2017）01-0007-04
家禽感染沙门氏菌是一个反复发生的世界性问题，它不仅威胁着动物健康，同时也威胁着公共健康。有效地防治沙门氏菌需要了解其生物学特性：沙门氏菌属分为两种类型：
● 非运动型沙门氏菌属，它由鸡伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌（Salmonella Gallinarum and Pullorum，SGP）组成。有些国家并不对这两种血清型进行区分。这一组的沙门氏菌属于D血清型，且对家禽有宿主特异性。虽然鸡也是其天然宿主，但它们也可以感染其他动物物种，且对感染的敏感性多变。
SGP能够引起鸡伤寒和鸡白痢，分别表现为成年鸡的慢性病和雏鸡及雏火鸡急性传染。这一组的沙门氏菌可以通过管理、检测和淘汰等手段进行净化，如美国、加拿大或者欧洲的许多国家都已净化。然而，世界其他地方仍遭受由其造成的经济损失。
● 运动型沙门氏菌属，有时也称为甲型副伤寒沙门氏菌（Paratyphoid Salmonellae，PTS），此类沙门氏菌具有非宿主特异性，人通过食用被污染的家禽产品会引发食源性疾病。
人沙门氏菌病的高发病率与人大量食用禽肉和家禽沙门氏菌高流行率密切相关。
1 第一步：鉴别潜在致病源
显而易见，这一步在鸡群沙门氏菌的净化中非常重要。传染的源头来自多种渠道，并且它们的相对重要性在很大的程度上取决于当地的流行病学背景：农场的数量、是否存在庭院式养鸡、野生家禽的数量、国内沙门氏菌的流行率、该国现有的控制方案，等等。
首要考虑的传染源就是种蛋。沙门氏菌可以通过种蛋进行垂直传播，但是在产蛋的同时和种蛋随后冷却过程中会污染壳膜。最主要的后果是几枚受到污染的种蛋在出雏期间能将这种污染传至整个孵化器和整个出雏室。因此，要种蛋供应商保证种鸡群处于良好的沙门氏菌状况。
孵化场的用水也是一个常见的感染源。无论是使用井水还是使用当地公共供水网络的自来水，污染的粪便通过下水道排到水源里是发生污染的主要途径。受污染的设备（鸡蛋托盘、鞋、车轮，等等）也能很容易机械传播该细菌。
多种脊椎动物（老鼠和野鸟）的肠道能够携带沙门氏菌且不表现出临床症状，或能够机械传播此细菌。同样地，苍蝇、甲虫或红螨等无脊椎动物可能成为沙门氏菌传播的潜在风险源。
人类同样也可以看作是一种感染的源头。孵化场的工作人员就存在此种风险，尤其是那些在自己家里饲养家禽和猪的人，或者那些近期发生食物中毒而没有采取正确医疗救助的人。美国疾病控制中心估算每报道一例人类沙门氏菌感染病例，就有29.3例没被报道出来。
当前一批污染没有经过适当的处理时，孵化场本身就可能会成为感染的源头，即使是种蛋来自于沙门氏菌净化的种鸡群，孵化期间污染仍会发生。
2 第二步：对潜在感染源采取具体的措施
在大多数的情况下，鸡群无沙门氏菌感染的状态可以通过适当的管理得到维持。请让我们来回顾一下解决上述每一种潜在感染源的主要方法。
孵蛋：大多数的措施显然针对供体的种鸡，部分措施围绕孵化场进行。以下是一些要点。
2.1 农场水平的措施
● 确保日龄鸡来自无沙门氏菌污染的鸡群。
● 种鸡生产采取全进/全出制，避免不同日龄的鸡群饲养在同一鸡舍内。
● 执行严格的有害生物（野生家禽、老鼠、苍蝇和螨，等）控制措施。
● 使用去污染的饲料，可用热处理或酸化处理。即使制粒不能作为饲料的净化措施，但颗粒饲料仍然比糊状或碎屑状饲料更安全。饲料原料的状态至关重要。动物源性的蛋白质也是一個很重要的风险因素。
● 实施严格的员工进出和更衣制度：每栋鸡舍应有专用的鞋、工作服和头套。
● 垫料管理：变质的垫料最有利于沙门氏菌的生长。
● 国家的政策允许对家禽进行免疫接种，这可以降低家禽对感染的敏感性。活疫苗和灭活疫苗都有供应，它们的使用目的不同。沙门氏菌的免疫力分体液免疫和细胞免疫。文献资料显示，最有效的免疫应答可以通过首免接种活疫苗，数周后接种灭活疫苗来获得。虽然细胞介导的免疫会减少肠道内的沙门氏菌群数量，但高抗体水平能够显著减少细菌在器官中的定植以及沙门氏菌通过种蛋进行传播。
● 养鸡场采取正确的种蛋管理措施：经常性集蛋，采取有效的消毒措施——最流行的方法是在适当的环境条件（温度 24 ℃/相对湿度85%，接触20 min）用以甲醛为主要成分的产品进行熏蒸消毒。
2.2 在孵化场
● 尽量减少同一个孵化室内孵化器的数量以避免交叉污染。
● 实施严格的员工进出和更衣制度：每栋孵化楼采用专用的鞋、工作服以及头套。
● 种蛋在无沙门氏菌污染的环境下孵化。
● 通过使用完整的或特异性的菌群实施竞争性排除措施，以便抑制沙门氏菌感染免疫力尚未形成的出壳雏鸡。
● 水：在饮水管道进入孵化场的入口处进行消毒。沙门氏菌对氯气敏感，但是氯气消毒法只有在特定的条件下才有效：pH低于7，低水平的铁的有机体。当饮水的化学条件不相称时，二氧化氯更适用。酸化处理也有助于水的净化，因为沙门氏菌偏好碱性环境。
● 有害生物的防控：捕鼠器和灭鼠药应该放置孵化场的多个重要通道上，苍蝇幼虫在热的和潮湿的粪便中更容易滋生。每当进行清洁和消毒时，应对墙体下方部位和垫料喷洒杀虫剂以杀灭甲虫和面粉虫的成虫和幼虫。
● 人：鸡场中有关人的生物安全管理措施同样适用于孵化场。确保员工不私自饲养家禽或其他农场动物，以此降低风险，同样要定期检查人员的带菌状态。 3 第三步：监测所采取措施的有效性
任何一个风险降低策略如果不配套監控和记录其效率，措施都是无用的。监测策略是成功消除沙门氏菌的关键要素：在正确的时间点进行正确的采样，并用正确的方法进行检测和分析。沙门氏菌检测通常有三种方法：细菌培养、血清学鉴定和聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）。
3.1 样本的类型和方法
沙门氏菌的检测可以是家禽样本（肝、盲肠），也可以是环境样本（拭子）。如果采用SGP方法，检测材料最好只用家禽样本，因为环境样本可能会出现假阴性结果。盲肠和盲肠扁桃体样本是最可靠的检测样本。在鸡场水平上，除足部拭子采集垫料样本以外，产蛋箱、鸡蛋传送带、饲料槽、墙壁或者家禽生活区的其他多尘区域的样本对PTS法高度敏感。
在孵化场水平，建议用棉拭对孵化器内壁或者雏鸡传送带采样。沙门氏菌可以从所有潜在的污染源分离到，如饲料、水、原料和有害生物。
细菌培养方法在许多官方文件（比如OIE、US NPIP、ISO 6579 v.2007）上都有介绍，读者应参考以获取更多的技术信息。
与家禽沙门氏菌感染有关的主要抗体应答可以使用血清学方法来检测。除了酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）方法外，快速凝集反应得到广泛应用。蛋黄抗体也能容易地检测。然而，仅使用血清学检测法会有一定的局限性。阳性结果未必能说明感染正在发生。另外，感染时和出现可检测抗体的时间之间存在时间差。亚临床感染或低水平感染有时似乎无法用血清学方法检测出，而细菌培养却呈阳性。最后，血清学方法并不适用于免疫家禽的检测，因为它无法区别感染的野毒株和疫苗株。
3.2 采样频率
应精心制定采样时间表，并考虑相关的法律法规是否有当地流行病学规定。表1列出了农场水平的采样方案。在现有的时间表中，每次出雏时通过擦拭采样来检测每一台出雏器，是控制并追踪因种蛋来源鸡群造成的孵化场沙门氏菌感染的一种简单有效的方法。孵化场的饮水每年应检测两次。SGP血清学检测数为60羽鸡，这可以在95%的置信度水平上检测出5%的流行率。
4 第四步：做好最坏的打算
在对孵化场进行沙门氏菌检测时，必须制定好应急计划。沙门氏菌通常对大多数的化学试剂敏感，但是应该注意按说明使用推荐剂量，因为剂量不足易形成抗药性。常规的方法再配合肥皂清洁剂，对所有物体的表面喷洒，随后用气雾消毒剂进行熏蒸消毒：铵/戊二醛和甲醛是一类高效并被广泛使用的消毒剂，联苯酚也是不错的选择。
抗菌素治疗备受争议，因为细菌很可能会对其产生抗药性，且极易遗传，因此不建议使用。此外，抗菌素治疗的效率并不一致：在雏鸡出生的头几天由于微生物群落的根除使得实际保护演变成沙门氏菌严重感染。
该计划应该包括对感染的潜在原因进行调查，以预防出现感染。
政府的相关部门已经要求家禽生产商对沙门氏菌进行控制和监测。因此，控制方案必须根据国内的情况进行精心制定，以便于降低鸡群（尤其是肉鸡和火鸡）和人沙门氏菌的感染水平。
此类政策的二个实例可参见欧洲（200-2010 EU肉鸡饲养准则）或北美（美国国家家禽改善方案）。此外，现代家禽贸易全球化为沙门氏菌传播创造了新的流行病学条件，禽产品出口国必须遵守进口国有关沙门氏菌感染状况的特定规定。
鉴于沙门氏菌普遍存在于世界各地以及其既可以水平传播又可以垂直传播的天然特性，任何旨在降低其流行率的措施必须包含于家禽生产的所有环节中。
本文的重点是可以在孵化场执行以确保其处于无沙门氏菌污染的措施。
5 结论
孵化场要实现无沙门氏菌污染需要考虑各个环节。精心制定可以获得且更重要的是保持无沙门氏菌污染的预防策略取决于其在任何孵化场、任何品种上品种都能够保持完全相同的一系列法规。
正如图1所示，360度全方位的方法可以在能够平衡该策略的五个方面之间实现均衡，从而全面创建无沙门氏菌孵化场。无论攻破任何一个角，孵化场仍将保持不败。□□
原题名：Taking steps tpwards a salmonella free hatchery（英文）
原作者：Olivier Leon博士
邵建忠 校 韩浩月 制图表
中图分类号：S851 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2017）01-0007-04
家禽感染沙门氏菌是一个反复发生的世界性问题，它不仅威胁着动物健康，同时也威胁着公共健康。有效地防治沙门氏菌需要了解其生物学特性：沙门氏菌属分为两种类型：
● 非运动型沙门氏菌属，它由鸡伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌（Salmonella Gallinarum and Pullorum，SGP）组成。有些国家并不对这两种血清型进行区分。这一组的沙门氏菌属于D血清型，且对家禽有宿主特异性。虽然鸡也是其天然宿主，但它们也可以感染其他动物物种，且对感染的敏感性多变。
SGP能够引起鸡伤寒和鸡白痢，分别表现为成年鸡的慢性病和雏鸡及雏火鸡急性传染。这一组的沙门氏菌可以通过管理、检测和淘汰等手段进行净化，如美国、加拿大或者欧洲的许多国家都已净化。然而，世界其他地方仍遭受由其造成的经济损失。
● 运动型沙门氏菌属，有时也称为甲型副伤寒沙门氏菌（Paratyphoid Salmonellae，PTS），此类沙门氏菌具有非宿主特异性，人通过食用被污染的家禽产品会引发食源性疾病。
人沙门氏菌病的高发病率与人大量食用禽肉和家禽沙门氏菌高流行率密切相关。
1 第一步：鉴别潜在致病源
显而易见，这一步在鸡群沙门氏菌的净化中非常重要。传染的源头来自多种渠道，并且它们的相对重要性在很大的程度上取决于当地的流行病学背景：农场的数量、是否存在庭院式养鸡、野生家禽的数量、国内沙门氏菌的流行率、该国现有的控制方案，等等。
首要考虑的传染源就是种蛋。沙门氏菌可以通过种蛋进行垂直传播，但是在产蛋的同时和种蛋随后冷却过程中会污染壳膜。最主要的后果是几枚受到污染的种蛋在出雏期间能将这种污染传至整个孵化器和整个出雏室。因此，要种蛋供应商保证种鸡群处于良好的沙门氏菌状况。
孵化场的用水也是一个常见的感染源。无论是使用井水还是使用当地公共供水网络的自来水，污染的粪便通过下水道排到水源里是发生污染的主要途径。受污染的设备（鸡蛋托盘、鞋、车轮，等等）也能很容易机械传播该细菌。
多种脊椎动物（老鼠和野鸟）的肠道能够携带沙门氏菌且不表现出临床症状，或能够机械传播此细菌。同样地，苍蝇、甲虫或红螨等无脊椎动物可能成为沙门氏菌传播的潜在风险源。
人类同样也可以看作是一种感染的源头。孵化场的工作人员就存在此种风险，尤其是那些在自己家里饲养家禽和猪的人，或者那些近期发生食物中毒而没有采取正确医疗救助的人。美国疾病控制中心估算每报道一例人类沙门氏菌感染病例，就有29.3例没被报道出来。
当前一批污染没有经过适当的处理时，孵化场本身就可能会成为感染的源头，即使是种蛋来自于沙门氏菌净化的种鸡群，孵化期间污染仍会发生。
2 第二步：对潜在感染源采取具体的措施
在大多数的情况下，鸡群无沙门氏菌感染的状态可以通过适当的管理得到维持。请让我们来回顾一下解决上述每一种潜在感染源的主要方法。
孵蛋：大多数的措施显然针对供体的种鸡，部分措施围绕孵化场进行。以下是一些要点。
2.1 农场水平的措施
● 确保日龄鸡来自无沙门氏菌污染的鸡群。
● 种鸡生产采取全进/全出制，避免不同日龄的鸡群饲养在同一鸡舍内。
● 执行严格的有害生物（野生家禽、老鼠、苍蝇和螨，等）控制措施。
● 使用去污染的饲料，可用热处理或酸化处理。即使制粒不能作为饲料的净化措施，但颗粒饲料仍然比糊状或碎屑状饲料更安全。饲料原料的状态至关重要。动物源性的蛋白质也是一個很重要的风险因素。
● 实施严格的员工进出和更衣制度：每栋鸡舍应有专用的鞋、工作服和头套。
● 垫料管理：变质的垫料最有利于沙门氏菌的生长。
● 国家的政策允许对家禽进行免疫接种，这可以降低家禽对感染的敏感性。活疫苗和灭活疫苗都有供应，它们的使用目的不同。沙门氏菌的免疫力分体液免疫和细胞免疫。文献资料显示，最有效的免疫应答可以通过首免接种活疫苗，数周后接种灭活疫苗来获得。虽然细胞介导的免疫会减少肠道内的沙门氏菌群数量，但高抗体水平能够显著减少细菌在器官中的定植以及沙门氏菌通过种蛋进行传播。
● 养鸡场采取正确的种蛋管理措施：经常性集蛋，采取有效的消毒措施——最流行的方法是在适当的环境条件（温度 24 ℃/相对湿度85%，接触20 min）用以甲醛为主要成分的产品进行熏蒸消毒。
2.2 在孵化场
● 尽量减少同一个孵化室内孵化器的数量以避免交叉污染。
● 实施严格的员工进出和更衣制度：每栋孵化楼采用专用的鞋、工作服以及头套。
● 种蛋在无沙门氏菌污染的环境下孵化。
● 通过使用完整的或特异性的菌群实施竞争性排除措施，以便抑制沙门氏菌感染免疫力尚未形成的出壳雏鸡。
● 水：在饮水管道进入孵化场的入口处进行消毒。沙门氏菌对氯气敏感，但是氯气消毒法只有在特定的条件下才有效：pH低于7，低水平的铁的有机体。当饮水的化学条件不相称时，二氧化氯更适用。酸化处理也有助于水的净化，因为沙门氏菌偏好碱性环境。
● 有害生物的防控：捕鼠器和灭鼠药应该放置孵化场的多个重要通道上，苍蝇幼虫在热的和潮湿的粪便中更容易滋生。每当进行清洁和消毒时，应对墙体下方部位和垫料喷洒杀虫剂以杀灭甲虫和面粉虫的成虫和幼虫。
● 人：鸡场中有关人的生物安全管理措施同样适用于孵化场。确保员工不私自饲养家禽或其他农场动物，以此降低风险，同样要定期检查人员的带菌状态。 3 第三步：监测所采取措施的有效性
任何一个风险降低策略如果不配套監控和记录其效率，措施都是无用的。监测策略是成功消除沙门氏菌的关键要素：在正确的时间点进行正确的采样，并用正确的方法进行检测和分析。沙门氏菌检测通常有三种方法：细菌培养、血清学鉴定和聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）。
3.1 样本的类型和方法
沙门氏菌的检测可以是家禽样本（肝、盲肠），也可以是环境样本（拭子）。如果采用SGP方法，检测材料最好只用家禽样本，因为环境样本可能会出现假阴性结果。盲肠和盲肠扁桃体样本是最可靠的检测样本。在鸡场水平上，除足部拭子采集垫料样本以外，产蛋箱、鸡蛋传送带、饲料槽、墙壁或者家禽生活区的其他多尘区域的样本对PTS法高度敏感。
在孵化场水平，建议用棉拭对孵化器内壁或者雏鸡传送带采样。沙门氏菌可以从所有潜在的污染源分离到，如饲料、水、原料和有害生物。
细菌培养方法在许多官方文件（比如OIE、US NPIP、ISO 6579 v.2007）上都有介绍，读者应参考以获取更多的技术信息。
与家禽沙门氏菌感染有关的主要抗体应答可以使用血清学方法来检测。除了酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）方法外，快速凝集反应得到广泛应用。蛋黄抗体也能容易地检测。然而，仅使用血清学检测法会有一定的局限性。阳性结果未必能说明感染正在发生。另外，感染时和出现可检测抗体的时间之间存在时间差。亚临床感染或低水平感染有时似乎无法用血清学方法检测出，而细菌培养却呈阳性。最后，血清学方法并不适用于免疫家禽的检测，因为它无法区别感染的野毒株和疫苗株。
3.2 采样频率
应精心制定采样时间表，并考虑相关的法律法规是否有当地流行病学规定。表1列出了农场水平的采样方案。在现有的时间表中，每次出雏时通过擦拭采样来检测每一台出雏器，是控制并追踪因种蛋来源鸡群造成的孵化场沙门氏菌感染的一种简单有效的方法。孵化场的饮水每年应检测两次。SGP血清学检测数为60羽鸡，这可以在95%的置信度水平上检测出5%的流行率。
4 第四步：做好最坏的打算
在对孵化场进行沙门氏菌检测时，必须制定好应急计划。沙门氏菌通常对大多数的化学试剂敏感，但是应该注意按说明使用推荐剂量，因为剂量不足易形成抗药性。常规的方法再配合肥皂清洁剂，对所有物体的表面喷洒，随后用气雾消毒剂进行熏蒸消毒：铵/戊二醛和甲醛是一类高效并被广泛使用的消毒剂，联苯酚也是不错的选择。
抗菌素治疗备受争议，因为细菌很可能会对其产生抗药性，且极易遗传，因此不建议使用。此外，抗菌素治疗的效率并不一致：在雏鸡出生的头几天由于微生物群落的根除使得实际保护演变成沙门氏菌严重感染。
该计划应该包括对感染的潜在原因进行调查，以预防出现感染。
政府的相关部门已经要求家禽生产商对沙门氏菌进行控制和监测。因此，控制方案必须根据国内的情况进行精心制定，以便于降低鸡群（尤其是肉鸡和火鸡）和人沙门氏菌的感染水平。
此类政策的二个实例可参见欧洲（200-2010 EU肉鸡饲养准则）或北美（美国国家家禽改善方案）。此外，现代家禽贸易全球化为沙门氏菌传播创造了新的流行病学条件，禽产品出口国必须遵守进口国有关沙门氏菌感染状况的特定规定。
鉴于沙门氏菌普遍存在于世界各地以及其既可以水平传播又可以垂直传播的天然特性，任何旨在降低其流行率的措施必须包含于家禽生产的所有环节中。
本文的重点是可以在孵化场执行以确保其处于无沙门氏菌污染的措施。
5 结论
孵化场要实现无沙门氏菌污染需要考虑各个环节。精心制定可以获得且更重要的是保持无沙门氏菌污染的预防策略取决于其在任何孵化场、任何品种上品种都能够保持完全相同的一系列法规。
正如图1所示，360度全方位的方法可以在能够平衡该策略的五个方面之间实现均衡，从而全面创建无沙门氏菌孵化场。无论攻破任何一个角，孵化场仍将保持不败。□□
原题名：Taking steps tpwards a salmonella free hatchery（英文）
原作者：Olivier Leon博士