【摘 要】
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采用PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1,构建最终的表达载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细
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采用PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1,构建最终的表达载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细胞,G418筛选,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,有限稀释法建立稳定过表达MI-CA基因的Tca8113-Tb细胞系,RT-PCR、real time PCR和免疫细胞化学检测MICA在该细胞中的表达。
The cDNA sequence of MICA gene in pCMV-SPORT6-MICA was amplified by PCR and cloned into eukaryotic expression vector pEGFP-N1 with green fluorescent protein (EGFP). The final expression vector pEGFP-N1-MICA was constructed. Tca8113-Tb cells were stained with G418, and the expression of green fluorescent protein (GFP) was observed under a fluorescence microscope. Tca8113-Tb cell line stably overexpressing MI-CA gene was established by limiting dilution. The expression of MICA Expression in this cell.
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