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目的 构建人类免疫缺陷病毒病毒 tat基因的重组分泌型真核表达载体并在真核细胞中表达，检测表达的重组蛋白活性。方法 聚合酶链反应（PCR）从重组质粒pcDNA3．1（＋）/Tat中扩增tat基因，利用 HindⅢ和Bam HⅠ酶切位点分别将tat基因正向、反向插入分泌型载体pSecT ag ，获得正向插入克隆（pSecT at ）和反向插入克隆（pSecTat-AS），经双酶切鉴定连接成功后，利用测序鉴定其序列和插入方向。将构建的重组质粒转染293细胞，利用Western blot法检测Tat蛋白的表达。