DKC1影响黏膜型黑色素瘤细胞的增殖、凋亡和细胞周期且与MEK-ERK通路相关

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hgjiao
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目的:研究角化不良素假尿苷合成酶1(dyskerin pseudouridine synthase 1,DKC1)对黏膜型黑色素瘤细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响及其可能的机制.方法:qPCR检测DKC1 mRNA在黏膜型黑色素瘤细胞系HMVⅡ、GAK和正常皮肤细胞株BJ中的表达水平;用DKC1 siRNA(si-DKC1组)和对照siRNA(si-Ctrl组)转染HMVⅡ和GAK细胞,干扰48 h后用qPCR和Western blotting验证敲减效率,CCK-8法检测敲减DKC1对黏膜型黑色素瘤细胞增殖的影响,流式细胞技术检测对细胞凋亡和周期的影响,Western blotting和qPCR检测MEK-ERK通路相关分子表达变化.结果:HMVⅡ、GAK细胞的DKC1 mRNA和蛋白表达水平均显著高于BJ细胞(均P<0.01).转染siRNA 48 h后,与si-Ctrl组相比,si-DKC1组HMVⅡ和GAK细胞中DKC1 mRNA和蛋白水平均显著降低(均P<0.01),细胞的增殖水平显著下降(P<0.05或P<0.01),细胞的凋亡率显著升高(均P<0.01)且促凋亡分子caspase 9、BAK和PUMA mRNA的表达显著升高(P<0.05或P<0.01),发生细胞周期阻滞(P<0.05或P<0.01),MEK和ERK1/2的磷酸化水平显著下调(P<0.05).结论:敲减DKC1可抑制黏膜型黑色素瘤细胞的增殖,促进细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡,其机制可能与MEK/ERK信号通路有关.
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