【摘 要】
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目的构建日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝星状细胞差异表达基因的消减cDNA文库,并筛选差异表达基因.方法取日本血吸虫尾蚴经腹部感染小鼠致肝纤维化.采用抑制性消减杂交技术(SSH)
【机 构】
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浙江大学医学院附属一院传染病研究所
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目的构建日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝星状细胞差异表达基因的消减cDNA文库,并筛选差异表达基因.方法取日本血吸虫尾蚴经腹部感染小鼠致肝纤维化.采用抑制性消减杂交技术(SSH),分离小鼠肝星状细胞(HSC)及正常小鼠HSC,通过对比寻找差异表达基因.将其与T载体连接(T/A克隆),其产物转化大肠埃希菌DH5α,经文库扩增后,随机挑取白色克隆进行酶切鉴定,克隆经过正、反向杂交,阳性克隆经过测序和BLAST(局部相似性基本查询工具)进行表达序列标签(ESTs)差异基因分析.最后经模拟Northern印迹确认基因表
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