【摘 要】
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目的探讨微小RNA-27a(miR-27a)模拟物和抑制物转染黑色素瘤WM239细胞后对细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-27a模拟物、抑制物及其阴性对照转染WM239细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测相应的微小RNA,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果细胞转染效率为80%~90%。转染miR-27a模拟物后,细胞内miR-27a表达
【机 构】
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250062 济南,山东省医学科学院基础医学研究所;济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院,山东省临沂市中医医院感染管理科,250062 济南,山东省医学科学院基础医学研究所;济南大学山东省医学科
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目的探讨微小RNA-27a(miR-27a)模拟物和抑制物转染黑色素瘤WM239细胞后对细胞增殖和凋亡的影响。
方法将miR-27a模拟物、抑制物及其阴性对照转染WM239细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测相应的微小RNA,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。
结果细胞转染效率为80%~90%。转染miR-27a模拟物后,细胞内miR-27a表达量明显上升(2-△△CT值为26.98±0.01),与正常对照组相比差异有统计学意义(t=-1 123.67,P=0.00);转染miR-27a抑制物后,细胞中miR-27a的表达量下降(2-△△CT值为0.96±0.02),与正常对照组相比差异无统计学意义(t=4.04,P=0.06)。转染miR-27a模拟物后,细胞增殖受到明显抑制,与正常对照组相比差异具有统计学意义[72 h吸光度(0.45±0.02)∶(0.72±0.01),F=129.56,P<0.05]。miR-27a模拟物组G0-G1期的细胞比例升高[(74.83±1.46)∶(63.73±1.25),F=30.33,P<0.05],S期和G2-M期细胞比例减少[(21.33±1.75)∶(27.50±1.25),F=14.98,P<0.05;(3.90±1.31)∶(8.80±2.10),F=3.66,P<0.05];模拟物组细胞凋亡率与正常对照组相比明显增加[(29.67±0.91)%∶(1.44±0.85)%,F=530.90,P<0.01];而抑制物组对细胞周期和凋亡无明显作用。
结论miR-27a抑制黑色素瘤细胞增殖,具有抑瘤作用,这与其促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0-G1期相关。
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