谷氨酰胺替代部分甘油对冻融猪精子获能和体外受精能力的影响

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:e5134
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本试验旨在探索用谷氨酰胺(Gln)替代部分甘油对冻融猪精子体外获能和受精能力的影响,试验分为6组:3%甘油对照组和5个处理组(Ⅰ~V组:2%甘油+谷氨酰胺(0、20、40、80和100 mmol/L)).对冻融松辽黑猪精子的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、鱼精蛋白水平、获能及体外受精等指标进行了检测.结果 显示,用谷氨酰胺替代部分甘油均对冻融精子质量有一定的改善作用,改善的程度受谷氨酰胺浓度的影响.与对照组相比,Ⅰ组精子的质量参数均显著下降(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子活力、顶体完整性和活率显著提高(P<0.05),Ⅲ组精子线粒体膜电位显著提高(P<0.05),V组精子活力、质膜完整性、顶体完整性、活率和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05).说明用谷氨酰胺替代部分甘油对精子质量具有很大的影响,且当谷氨酰胺为100 mmol/L时可得到更高质量的精子,因此,后续试验使用浓度为100 mmol/L的谷氨酰胺进行研究.与对照组相比,2%甘油+100 mmol/L谷氨酰胺处理组精子鱼精蛋白缺失率显著下降(P<0.05),精子获能无显著差异(P>0.05),但胚胎卵裂率显著提高(P<0.05).综上所述,谷氨酰胺可作为一种新型冷冻保护剂替代部分甘油来提高猪精液的质量,并降低甘油对猪精液的毒性作用,为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供技术支撑.
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研究通过检测鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响,旨在为阐明鞘磷脂对解偶联蛋白1(UCP1)基因敲入猪骨骼肌生长的影响提供理论依据.用ELISA法检测野生型猪和UCP1敲入猪背部肌肉及血清中总鞘磷脂含量;利用CCK8法检测不同浓度(0、5、20、50和100 μg/mL)鞘磷脂对C2C12细胞增殖和毒性的影响,并通过形态学观察和分化前后细胞成肌分化标记基因生肌因子5(Myf5)、生肌决定因子(MyoD)、肌细胞生成素(Myogenin)、生肌调节因子4(MRF4)的表达检测,建立C2C12成肌分