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在单因素试验的基础上，选定保温时间、保温温度、pH值三个因素的三个水平进行中心组合试验，建立了淡水鲫鱼脑、肌肉和肝脏乙酰胆碱酯酶（ACHE）酶活的二次回归方程。此模型拟合良好，通过响应面分析得到了酶活测定的优化组合条件。结果表明：保温时间、保温温度、pH值对酶活都有极其显著影响，鱼脑酶活测定的最佳条件为保温时间35min，保温温度32℃，pH7．6。肝脏酶活测定最伟条件为保温时间28min，保温温度30℃，pH7．6。肌肉酶活测定的最佳条件为保温时间31min，保温温度31℃，pH7．6。