人酪蛋白激酶1激酶区真核表达载体的构建及鉴定

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaoxi21175

【摘要】

：

目的：构建带Flag标签的酪蛋白激酶1α（CK1α）激酶区截短突变体CK1α（1-285aa）的真核表达载体,获得其表达产物,并验证该激酶区与已知相互作用蛋白Myc-Cdc25A之间的相互作用。方法：用

【作者】

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尤文叶褚春雨徐小洁梁迎春洪甜黄俊韩笑叶棋浓杨

【机构】

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中国人民解放军总医院,河北省文安县医院普内科,军事医学科学院生物工程研究所

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2016年6期

【关键词】

：

酪蛋白激酶1α 真核表达 CDC25A casein kinase 1α eukaryotic expression Cdc25A

【基金项目】

：

吴阶平医学基金（wjp-lc-11037）, 国家自然科学基金（31100604）, 北京市科技新星计划（Z141102001814055）, 北京市自然科学基金（7132155）

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目的：构建带Flag标签的酪蛋白激酶1α（CK1α）激酶区截短突变体CK1α（1-285aa）的真核表达载体,获得其表达产物,并验证该激酶区与已知相互作用蛋白Myc-Cdc25A之间的相互作用。方法：用PCR技术从人全长CK1α真核表达载体中扩增CK1α（1-285aa）,将其克隆到Flag载体中,将重组质粒转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测其在人293T细胞中的表达情况,免疫共沉淀分别检测Flag-CK1α全长、Flag-CK1α（1-285aa）与Myc-Cdc25A的相互作用。结果：双酶

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