Avidin—HRP制备及其实验因素的控制

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本文报导将过碘酸法连接亲和素和辣根过氧化物酶用于ELISA技术,以增加标准ELISA的敏感性用于检测人IgG。亲和素与活化辣根过氧化物酶克分子比例与敏感性相关,1:1.5比例最为敏感。比较了化学修饰亲和素—辣根酶酸和亲和素—辣根酶两种连接物。前者用于BA—ELISA,敏感性限度高于标准ELISA 4倍,并且实验结果相当稳定;亲和素—辣根酶用于BA—ELISA,比普通ELISA敏感4—16倍,但是,由于存在强非特异性吸附和高变异系数,对于大多数用途的检测是不能接受的。其它可能改善BA—ELISA的实验因素作了讨论。 This paper reports the use of periodic acid-linked avidin and horseradish peroxidase for ELISA to increase the sensitivity of standard ELISA for the detection of human IgG. The ratio of avidin to activated horseradish peroxidase is related to the sensitivity and the ratio of 1: 1.5 is the most sensitive. The chemical modification of avidin - horseradish enzyme and avidin - horseradish enzyme were compared. The former was used in BA-ELISA, the sensitivity limit was 4 times higher than that of standard ELISA, and the experimental results were quite stable. Avidin-HRP was used in BA-ELISA, which was 4-16 times sensitive than normal ELISA. However, Non-specific adsorption and high coefficient of variation are not acceptable for most uses. Other experimental factors that may improve BA-ELISA are discussed.
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