为了评价Eu³⁺免疫探讨标记喹乙醇克隆抗体的效果,以环化二乙烯三胺五醋酸酐（cy DTPA）为螯合剂,将Eu³⁺偶联到喹乙醇单克隆抗体（OLA-m Ab）上,制备喹乙醇铕标抗体(Eu³⁺-OLA-m Ab),并在此基础上进行TRFIA反应条件的优化。结果表明,优化后的直接竞争时间分辨荧光免疫分析（TRFIR）反应条件为包被抗原（OLA-OVA）浓度1.2μg·m L-1、铕标抗体浓度2.0μg·m L-1、CBS浓度0.05 mol·L-1、PBS稀释液0.01 mol·L-1、p H值7.0,采用含5%甲醇的PBS配制喹乙醇标样。反应条件筛选优化后建立标准曲线,其IC50和IC10浓度分别为9.29、0.66 ng·m L-1。以饲料为样品进行添加回收率试验,其回收率处于84.80%¹13.60%之间,变异系数小于14%。本研究建立的TRFIA方法具有灵敏度高、稳定性好等特点,为下一步研发喹乙醇TRFIA快速检测试剂盒奠定了基础。