观察长链非编码RNA HIF1A-AS1对缺氧诱导的胰腺癌PANC1细胞自噬的调节作用。
方法应用三气培养箱及缺氧混合气体(94%N2、5% CO2、1% O2)缺氧培养胰腺癌PANC1细胞3、6、12、24、36、48 h，实时荧光定量PCR法检测HIF1A-AS1的表达。通过携带HIF1A-AS1过表达的重组腺病毒感染PANC1细胞和通过脂质体将靶向HIF1A-AS1的siRNA转染PANC1细胞分别获得过表达、低表达HIF1A-AS1的PANC1细胞株，以常规培养的PANC1细胞作为对照。对照组、过表达组、低表达组细胞分别缺氧培养24 h，采用实时荧光定量PCR法检测各组PANC1细胞HIF1A-AS1的表达，流式细胞术检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白Beclin 1的表达。
结果缺氧培养的PANC1细胞HIF1A-AS1的表达随缺氧时间的延长而增加，36 h时达峰值，从6 h开始均显著高于对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。以对照组表达量为1，过表达组、低表达组细胞HIF1A-AS1的表达量分别为4.49±0.53、0.49±0.07，过表达组高于对照组，低表达组低于对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。对照组、过表达组、低表达组PANC1细胞经缺氧培养24 h后的细胞凋亡率分别为(8.27±1.28)%、(6.56±1.49)%、(19.9±2.34)%，过表达组低于对照组，低表达组高于对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)；Beclin 1表达量分别为1.05±0.11、1.29±0.19、0.38±0.18，过表达组高于对照组，低表达组低于对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。
结论HIF1A-AS1可能通过促进缺氧诱导胰腺癌PANC1细胞的自噬，参与胰腺癌的发病过程。