猪瘟病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定

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根据猪瘟病毒衣壳蛋白(C)基因序列设计一对引物,RT—PCR扩增获得编码猪瘟病毒衣壳蛋白的C基因,将其插入到含有葡萄球菌核酸酶(SN)基因的真核表达载体pcDNA-SN中,筛选获得重组质粒pcDNA—C—SN。脂质体转染猪肾细胞(PK-15),并经G418稳定筛选,通过RT—PCR、免疫印迹和间接免疫荧光鉴定表达的融合蛋白,体外DNA消化试验检测核酸酶活性。结果表明融合蛋白C—SN在PK-15细胞中获得了稳定表达,能够被兔抗猪瘟病毒衣壳蛋白多抗所识别,并具有良好的核酸酶活性,能够对DNA进行切割。同时,稳
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