人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体的构建及酵母表达菌株的建立

来源 :中华男科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lzliang

【摘要】

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目的:在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶(L-PGDS),以利于生物学功能及临床应用研究.方法:用PCR的方法从质粒pGEX-2T/htL-PGDS上扩增出人睾丸L-PGDS基因编码

【作者】

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高云黄宇烽夏欣一马百坤

【机构】

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南京医科大学免疫学与病原生物学学系,南京军区南京总医院生殖遗传研究室

【出处】

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中华男科学

【发表日期】

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2003年2期

【关键词】

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人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体临床应用毕赤酵母 Prostaglandin D synthase Pichia Pastoris Se

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目的:在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶(L-PGDS),以利于生物学功能及临床应用研究.方法:用PCR的方法从质粒pGEX-2T/htL-PGDS上扩增出人睾丸L-PGDS基因编码序列,构建该基因的酵母表达质粒;将表达质粒电转化毕赤酵母,甲醇诱导L-PGDS的表达.结果:PCR扩增的L-PGDS成熟肽基因编码序列克隆T载体后,经测序证明与所报道的人睾丸L-PGDS cDNA完全一致.对培养上清进行SDS-PAGE分析显示,在相对分子质量为27000处有重组蛋白的表达,与理论值完全

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