重组人ICOS胞外区原核表达载体的构建及表达

来源 :江苏农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：serene_he

【摘要】

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构建重组人ICOS胞外区原核表达载体,并进行初步表达。根据GenBank基因库中ICOS胞外区基因序列设计引物,用RT-PCR法从人T淋巴瘤细胞Jurkat的总mRNA中扩增出ICOS胞外区基因并运

【作者】

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李文秀周凤云毛伟平潘杨滨何志娟徐翀刘宣宣

【机构】

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南京师范大学生命科学学院／江苏省分子医学重点实验室

【出处】

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江苏农业科学

【发表日期】

：

2011年2期

【关键词】

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ICOS JURKAT细胞 pET-28a质粒重叠延伸PCR 原核表达

【基金项目】

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江苏省教育厅自然科学基金（编号：08KJD350002）.

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构建重组人ICOS胞外区原核表达载体,并进行初步表达。根据GenBank基因库中ICOS胞外区基因序列设计引物,用RT-PCR法从人T淋巴瘤细胞Jurkat的总mRNA中扩增出ICOS胞外区基因并运用重叠延伸PCR技术扩增出ICOS胞外区同源二聚体,并将ICOS胞外区同源二聚体插入到原核表达载体PET-28a中,并对重组质粒进行鉴定。转化E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果获得ICOS胞外区同源二聚体基因大小为757 bp,构建的重组表达载体中目的基因序列完全正确。IPTG诱导表达后,SD

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