【背景】N₂O是一种很强的温室气体,其温室效应强度大约是CO₂的265倍。土壤氮肥施加量是影响N₂O排放的重要因素,而厌氧条件下微生物反硝化则是N₂O产生的重要途径。【目的】研究过量施肥条件下蔬菜大棚土壤菌群结构变化及其对N₂O气体排放的影响。【方法】利用自动化培养与实时气体检测系统（Robot）监测土壤厌氧培养过程中N₂O和N₂排放通量,比较过量施肥和减氮施肥模式下土壤N₂O排放模式的差异。通过Illumina二代测序平台对这2种不同施肥处理的土壤微生物群落进行高通量测序,研究不同施肥量对土壤菌群组成的影响。【结果】过量施肥土壤中硝酸盐的含量大约是减氮施肥土壤的2倍,通过添加硝酸盐使2种土壤的硝酸盐含量均为60 mg/kg或为200 mg/kg时,过量施肥土壤在厌氧培养前期N₂O气体的产生量及产生速度都明显高于减氮施肥土壤。另外,过量施肥导致土壤菌群结构发生显著改变,并且降低了土壤微生物的多样性。相对于减氮施肥,过量施肥方式富集了Rhodanobacter属的微生物。PICRUSt预测结果显示,传统施肥没有显著改变反硝化功能基因相对丰度。【结论】长期过量氮肥施用显著增加了土壤N₂O的排放,可能原因是施肥改变了包括氮转化相关微生物在内的土壤菌群组成,从而影响了土壤N₂O气体的形成与还原过程。