CRKL基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :国际肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lihai_feng

【摘要】

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目的构建CBKL基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法将筛选确定的CRKL基因RNAi有效靶序列克隆到pGCL-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shCRKL慢病毒载体.通

【作者】

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沈绍华刘爱华亓春花叶欣顾龙君

【机构】

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泰安市中心医院儿科,上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心血液肿瘤科

【出处】

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国际肿瘤学杂志

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

RNA干扰磷酸酪氨酸信号传导 RNA interference Phosphotyrosine Signal transduction

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目的构建CBKL基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法将筛选确定的CRKL基因RNAi有效靶序列克隆到pGCL-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shCRKL慢病毒载体.通过酶切、测序验证后,用LV-shCRKL、pHelper 1.0和pHelper2.0质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果载体片段插入正确.共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒LV-shCRKL.结论成功构建了人CRKL基因RNAi病毒载体.

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