【摘 要】
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目的建立一种温州病毒（Wenzhou virus,WENV）的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法。方法分析WENV保守区域并设计特异引物,以特异扩增产物构建的阳性重组质粒为标准品,建立SYBR G
【机 构】
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海南医学院热带医学与检验医学院,海南医学院热带医学转化重点实验室
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目的建立一种温州病毒（Wenzhou virus,WENV）的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法。方法分析WENV保守区域并设计特异引物,以特异扩增产物构建的阳性重组质粒为标准品,建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应的扩增曲线和溶解曲线,获得标准曲线。结果建立的WENV的荧光定量PCR标准曲线在1×10~1~1×10~8拷贝/μl的浓度时呈现良好线性关系,其扩增相关系数为0.999,熔解曲线只出现1个特异峰,无引物二聚体,检测下限可达10拷贝。利用WENV的样
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