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摘要：目的：研究AD模型大鼠雌孕激素水平变化对其神经元及行为学的影响，并通过干预雌孕激素水平进一步了雌孕激素水平对AD模型大鼠神经元的作用，旨在发现AD患者雌孕激素干预可能性。
方法：取样本120只随机分为6组，分为正常组20只，AD去势成模大鼠100只分为5组手术正常组、孕激素组（黄体酮）、孕+雌激素组（雌二醇+黄体酮）、雌激素组（雌二醇）、对照组（无菌芝麻油），行水迷宫实验，处死切片行免疫组织化学技术、TUNEL染色、western blot。
结果：潜伏期手术正常组最长、对照组其次、孕激素组再次、刺激素组再次、孕+雌激素组再次、AD正常组最次，孕激素、孕+雌激素组、雌激素组GFAP、ChAT、5-ht2A免疫反应阳性细胞计数、TUNEL检验凋亡细胞计数、各表达western blot灰度较对照组、手术正常组少，差异具有统计学意义（P<0.05）。
结论：给予AD模型卵巢去势注射雌性孕激素能有效保护神经组织，抑制细胞凋亡、损伤，抑制行为、认知能力丧失。
关键词：雌孕激素 阿尔茨海默病 神经元损伤
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）04-0016-01
阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病，临床主要表现为记忆、认知、执行、行动、视线等功能障碍，人格与行为改变等痴呆表现，俗称老年性痴呆也可发病于中年，发病率较高，严重影响患者生存能力与质量[1]。
1 材料及方法
1.1 材料。5月龄健康雌性Wistar大鼠，标准养殖箱，无菌芝麻油、多聚甲醛、甲醇、乙醇等实验室或购买制备常备物质；主要试剂：BCA蛋白测定试剂盒、TUNEL凋亡检测试剂盒，等；主要仪器设备：高压灭菌锅、恒温干燥箱、磁力搅拌机、微量电子天平、离心机、酶标仪、荧光实验显微镜、水迷宫、透射电子显微镜等[2]。
1.2 方法。
1.2.1 模型与分组。5月龄健康雌性Wistar大鼠，体重（200±30）g。
（1）建立AD模型，采用普通饲料适应性喂养实验1周后开始试验，按体重8%的进食量天界55.9mg/kg体重AlCl36H2O喂养，3个月，未见死亡例，行脑组织、血清SOD活性、MDA水平检验，差异不显著（P<0.05），模型建立成功。
（2）随机选取其中80只行卵巢去势手术（SC），以0.3ml/100g体重标准腹腔注射复合麻醉，未见后肢反射完成麻醉后，标本取仰卧位，置于手术台，沿腹部正中线，做约2.0～3.0cm切口，探查子宫结扎、切除卵巢后缝合。
1.2.2 实验方法。
（1）水迷宫实验：标准操作，水温22℃，每只实验120s，通过摄像头、计算机跟踪记录；所有实验大鼠实验前环境相同，给予3d训练，记录小鼠完成时间。
（2）切片：完成水迷宫实验后取脑组织：手术步骤，注射麻醉，升主动脉，于右心耳灌注4℃恒温生理盐水300ml，待血液澄清时，灌注4%聚甲醛500ml，取大脑组织，置4%聚甲醛，4℃恒温保温，1夜后换置于30%蔗糖溶液，待组织融入后，行OCT包埋，运用冷冻切片机连续切片。
1.3 统计学处理。本次研究当中的所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理，计量资料采用均数±标准差（X±S）表示，P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 模型构建。AD模型构建成功、AD去势模型构建成功，各组于处死前未见死亡例。
2.2 水迷宫实验。潜伏期手术正常组最长、对照组其次、孕激素组再次、刺激素组再次、孕+雌激素组再次、AD正常组最次，差异显著（P<0.05）（见表1）。
2.3 相关检测。免疫组织化学检验各组间差异具有统计学意义（P<0.05），孕激素、孕+雌激素组、雌激素组GFAP、ChAT、5-ht2A免疫反应阳性细胞计数较少，差异显著（P<0.05）。孕激素、孕+雌激素组、雌激素组TUNEL检验凋亡细胞计数较对照组、手术正常组少，差异具有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
雌性孕激素与神经功能相关性研究较广，已获得了许多有益的成果，大部分学者实验均表明雌性孕激素对于急性中枢神经损伤有一定的保护作用。本次研究中应用雌孕激素于AD模型卵巢去势大鼠能有效的保护神经细胞，抑制其凋亡、减少损伤，维持行为意识功能，较未使用者差异显著（P<0.05）。目前临床上已有相关替代治疗方法，女性绝经因雌性激素分泌终止或大幅减少致AD，运用雌孕激素替代治疗取得了一定成效。
本实验只观察了1个月时间，没有对激素应用进行动态观察，在一定程度上降低了实验的精密性。本实验没有对雌孕激素的量及二者间比例进行动态观察。以上也是下一步进一步实验的起点。
参考文献
[1] 李润辉.阿尔兹海默病的研究现状[J].沈阳医学院学报，2013，15（03）：129-133
[2] 朱皓，高凯，张连峰.阿尔兹海默病小鼠模型的磁共振影像学分析[J].中国比较医学杂志，2012，22（12）：48-53
[3] 薛改，吴红海，侯艳宁.孕酮对大鼠大脑皮质神经元氨基酸类神经递质释放的影响[N].中国药理学通报，2008-5-24（5）
方法：取样本120只随机分为6组，分为正常组20只，AD去势成模大鼠100只分为5组手术正常组、孕激素组（黄体酮）、孕+雌激素组（雌二醇+黄体酮）、雌激素组（雌二醇）、对照组（无菌芝麻油），行水迷宫实验，处死切片行免疫组织化学技术、TUNEL染色、western blot。
结果：潜伏期手术正常组最长、对照组其次、孕激素组再次、刺激素组再次、孕+雌激素组再次、AD正常组最次，孕激素、孕+雌激素组、雌激素组GFAP、ChAT、5-ht2A免疫反应阳性细胞计数、TUNEL检验凋亡细胞计数、各表达western blot灰度较对照组、手术正常组少，差异具有统计学意义（P<0.05）。
结论：给予AD模型卵巢去势注射雌性孕激素能有效保护神经组织，抑制细胞凋亡、损伤，抑制行为、认知能力丧失。
关键词：雌孕激素 阿尔茨海默病 神经元损伤
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）04-0016-01
阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病，临床主要表现为记忆、认知、执行、行动、视线等功能障碍，人格与行为改变等痴呆表现，俗称老年性痴呆也可发病于中年，发病率较高，严重影响患者生存能力与质量[1]。
1 材料及方法
1.1 材料。5月龄健康雌性Wistar大鼠，标准养殖箱，无菌芝麻油、多聚甲醛、甲醇、乙醇等实验室或购买制备常备物质；主要试剂：BCA蛋白测定试剂盒、TUNEL凋亡检测试剂盒，等；主要仪器设备：高压灭菌锅、恒温干燥箱、磁力搅拌机、微量电子天平、离心机、酶标仪、荧光实验显微镜、水迷宫、透射电子显微镜等[2]。
1.2 方法。
1.2.1 模型与分组。5月龄健康雌性Wistar大鼠，体重（200±30）g。
（1）建立AD模型，采用普通饲料适应性喂养实验1周后开始试验，按体重8%的进食量天界55.9mg/kg体重AlCl36H2O喂养，3个月，未见死亡例，行脑组织、血清SOD活性、MDA水平检验，差异不显著（P<0.05），模型建立成功。
（2）随机选取其中80只行卵巢去势手术（SC），以0.3ml/100g体重标准腹腔注射复合麻醉，未见后肢反射完成麻醉后，标本取仰卧位，置于手术台，沿腹部正中线，做约2.0～3.0cm切口，探查子宫结扎、切除卵巢后缝合。
1.2.2 实验方法。
（1）水迷宫实验：标准操作，水温22℃，每只实验120s，通过摄像头、计算机跟踪记录；所有实验大鼠实验前环境相同，给予3d训练，记录小鼠完成时间。
（2）切片：完成水迷宫实验后取脑组织：手术步骤，注射麻醉，升主动脉，于右心耳灌注4℃恒温生理盐水300ml，待血液澄清时，灌注4%聚甲醛500ml，取大脑组织，置4%聚甲醛，4℃恒温保温，1夜后换置于30%蔗糖溶液，待组织融入后，行OCT包埋，运用冷冻切片机连续切片。
1.3 统计学处理。本次研究当中的所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理，计量资料采用均数±标准差（X±S）表示，P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 模型构建。AD模型构建成功、AD去势模型构建成功，各组于处死前未见死亡例。
2.2 水迷宫实验。潜伏期手术正常组最长、对照组其次、孕激素组再次、刺激素组再次、孕+雌激素组再次、AD正常组最次，差异显著（P<0.05）（见表1）。
2.3 相关检测。免疫组织化学检验各组间差异具有统计学意义（P<0.05），孕激素、孕+雌激素组、雌激素组GFAP、ChAT、5-ht2A免疫反应阳性细胞计数较少，差异显著（P<0.05）。孕激素、孕+雌激素组、雌激素组TUNEL检验凋亡细胞计数较对照组、手术正常组少，差异具有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
雌性孕激素与神经功能相关性研究较广，已获得了许多有益的成果，大部分学者实验均表明雌性孕激素对于急性中枢神经损伤有一定的保护作用。本次研究中应用雌孕激素于AD模型卵巢去势大鼠能有效的保护神经细胞，抑制其凋亡、减少损伤，维持行为意识功能，较未使用者差异显著（P<0.05）。目前临床上已有相关替代治疗方法，女性绝经因雌性激素分泌终止或大幅减少致AD，运用雌孕激素替代治疗取得了一定成效。
本实验只观察了1个月时间，没有对激素应用进行动态观察，在一定程度上降低了实验的精密性。本实验没有对雌孕激素的量及二者间比例进行动态观察。以上也是下一步进一步实验的起点。
参考文献
[1] 李润辉.阿尔兹海默病的研究现状[J].沈阳医学院学报，2013，15（03）：129-133
[2] 朱皓，高凯，张连峰.阿尔兹海默病小鼠模型的磁共振影像学分析[J].中国比较医学杂志，2012，22（12）：48-53
[3] 薛改，吴红海，侯艳宁.孕酮对大鼠大脑皮质神经元氨基酸类神经递质释放的影响[N].中国药理学通报，2008-5-24（5）