目的运用无血清培养基悬浮培养的方法从数个食管鳞癌细胞株中分离出微球体,并对其癌干细胞特性进行鉴定。方法使用无血清培养基DMEM/F12添加20 ng/mL EGF、10 ng/mL bFGF、5%B27和5μg/mL胰岛素的方法从3个食管鳞癌细胞株EC109、EC9706和HK-3中分离出微球体,并从增殖能力、克隆形成能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力、干性基因的表达能力证实HK-3的微球体是否有癌干细胞的特点,同时分析了3个食管鳞癌细胞株恶性程度与其癌干细胞干性之间的关系。结果我们发现3个食管鳞癌细胞株均有形成微球体的能力,其中HK-3微球体比普通贴壁HK-3细胞有更强的增殖能力、克隆形成能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力,表达更高的干性基因如ABCG2和ALDH1,而且EC109、EC9706和HK-3表达c-myc的蛋白量逐渐降低,形成微球体的能力及干性基因的表达量亦逐渐降低。结论食管鳞癌细胞株存在癌干细胞样细胞,且其恶性程度与癌干细胞的比例成正相关。