金银忍冬腋芽离体培养技术研究

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  摘要:以金银忍冬腋芽作为外植体进行离体培养技术研究,得出:把消毒后的腋芽切割成0.3毫米转入MS+KT 0.5 毫克/升+NAA 0.2 毫克/升培养基,分化率达到100%;然后将分化后的不定芽切割成1厘米小段转入MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升培养基,增殖效果最好;将增殖的大量茎段切割成2 厘米小段转入1/2 MS+IBA 0.8 毫克/升生根培养基中,生根效果最佳。
  关键词:培养基配方;金银忍冬;腋芽
  基金项目:吉林省高等学校大学生创新创业训练项目(2015004)
  中图分类号: S567.7 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2017.01.017
  金银忍冬(Lonicera maackii(Rupr.) Maxim.)又叫金银木,为落叶灌木,其多个器官均可入药,根可解毒截疟,茎叶祛风解毒,活血祛瘀,花淡、平,可祛风解表,消肿解毒,完全可代替金银花入药。目前,金银忍冬常用繁殖方法为播种和扦插。播种繁殖过程复杂且萌发率不高,扦插繁殖季节限制嚴格,管理方面要求较高,这些都影响到金银忍冬苗木的快速、大量、优质繁殖。随着器官离体培养技术的发展,利用其快速、高效、去毒的优点,本试验尝试采用离体培养技术进行金银忍冬繁殖。
  1材料与方法
  1.1试验材料
  2016年6月20日于吉林农业科技学院校园挑选生长良好、无病虫害的金银忍冬植株,采集带腋芽的枝条若干,带回组培室实验室消毒接种。
  1.2 试验方法
  1.2.1材料处理 将采集回来的枝条切成小段,每段带一腋芽,在自来水下用流水冲洗20分钟,然后用0.5%的84消毒液浸泡15分钟,用无菌水冲洗3~4次,再放入0.05%次氯酸钠(NaClO3)溶液中浸泡8分钟,无菌水冲洗后放入超净台备用。
  1.2.2培养基配方 初代诱导培养基:A1:MS+KT 1.0 毫克/升+NAA 0.1 毫克/升;A2:MS+KT 1.0毫克/升+NAA 0.2毫克/升;A3:MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.1 毫克/升;A4:MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升。增殖培养基:B1:MS+KT 0.5毫克/升;B2:MS+KT 0.5 毫克/升+IAA 0.02毫克/升;B3:MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.04 毫克/升;B4:MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.06毫克/升;B5:MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.02毫克/升;B6:MS+KT 0.5 毫克/升+IBA 0.04毫克/升; B7:MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.06毫克/升。生根培养基:C1:1/2MS+IBA 0.5 毫克/升;C2:1/2MS+IBA 0.8毫克/升;C3:1/2MS+IBA 1.0 毫克/升L。以上培养基均添加琼脂6克/升,蔗糖30克/升,pH值均调整为5.6。
  1.2.3培养条件 培养室湿度保持在80%,初代诱导阶段温度20℃,光照强度1600 Lx,光照時间12小时;继代增殖阶段温度25℃,光照强度2000 Lx,光照时间14小时;生根阶段温度25℃,光照强度3000 Lx,光照时间14小时。
  2结果与分析
  2.1 不同初代诱导培养基上诱导不定芽情况
  腋芽茎尖接种后均有不同程度的分化。20天左右茎尖开始分化出愈伤组织,进而愈伤组织出现突起,后来突起分化出不定芽,接种后55天开始统计不定芽诱导生长情况,具体结果见表1。由表1可以看出,从A1~A4,分化率、平均芽数及芽高各不相同,比较得出A4(MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2 毫克/升)分化瓶数最多、分化率最高、平均芽数最多,平均芽高最高,为最佳的培养基。
  2.2不同增殖培养基上增殖情况
  不定芽切段转接到各继代增殖培养基配方,各小段开始生长,转瓶28天统计各瓶中苗木的增殖状况,具体结果见表2。由表2可以看出,B5增殖倍数最大,其次为B6和B7,说明添加NAA有利于增殖,综合比较,B6(MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升)增殖效果最好。
  2.3不同生根培养基上生根情况
  将继代增殖的苗切段转入生根培养基,25天统计各配方中苗木的生根状况,具体结果见表3。由表3可以看出,C1、C2、C3配方生根率均较高,说明1/2 MS配方中添加IBA有利于生根;比较C1、C2、C3配方,生根率均为100%,但C2平均根数最多,另产生的根系粗壮,所以,C2(1/2 MS+IBA 0.8毫克/升)最适合作为生根培养基。
  3结论与讨论
  通过4个培养基配比对金银忍冬腋芽进行诱导,得出诱导最佳配方为MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升,诱导率达到100%,产生的不定芽数较多,平均达到8个以上,且不定芽生长健壮;通过比较7个配比对苗木的增殖状况,得出MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升配方最有利于苗木增殖;通过比较3个配比对苗木的生根状况,得出1/2 MS+IBA 0.8毫克/升配方有利于生根,生根率达到100%。腋芽是植物的常见器官,另接种腋芽茎尖能达到脱毒的效果,所以本试验利用腋芽茎尖进行了离体诱导培养,另得出了诱导、增殖、生根三个阶段的最佳培养方式,试验仅针对培养室培养阶段进行比较,对于金银忍冬组培瓶苗的出瓶方式、基质选择、出瓶后管理栽培等方面还有待于进一步研究探讨。
  参考文献
  [1] 潭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1996:54.
  [2] 胡莹,杨柳青.山茶科植物组织培养研究进展[J].江苏农业科学,2008(02):6-8.
  作者简介:张健,2013级中药学专业学生,研究方向:植物栽培。
  通讯作者:建德锋,硕士,副教授,研究方向:植物栽培。
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