多位点可变数量串联重复序列分析在北京家族结核分枝杆菌基因分型中的应用及位点筛选

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目的对于北京家族菌株占绝大多数的感染人群,评价多位点可变数量串联重复序列(variable number tandem repeats,VNTR)分析(multiple loci VNTR analysis,MLVA)中不同位点组合在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)基因分型研究中的应用。并以IS6110限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)为参照,筛选有效位点。方法分别采用IS6110-RFLP、间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)及MLVA不同位点组合对北京海淀区收集的MTB临床分离株进行基因分型研究,比较3种方法及MLVA不同位点组合的分型效果。结果 45株MTB分离株中86.7%为北京家族菌株,Spoligotyping和结核分枝杆菌散在分布重复单位(mycobacterial interpersed repetitive units,MIRU)-12系列的HGI(Hunter-Gaston Index)值分别为0.4313和0.8700,将45株MTB菌株分为10个和23个基因型。VNTR-9系列和IS6110-RFLP的分型结果一致,HGI值较高,为0.9980,将45株MTB菌株分为43个基因型。结论北京家族结核分枝杆菌在北京海淀区呈高水平流行。对于北京地区北京家族菌株占绝大多数的感染人群,VNTR-9系列MLVA是较为简便和高分辨率的分型方法 ,其分辨率能够达到MTB基因分型“金标准”IS6110-RFLP水平。 Objective To assess the association of different loci in multiple loci VNTR analysis (MLVA) in multi-site infectious population of Mycobacterium tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis, MTB) genotyping applications. The IS6110 restriction fragment length polymorphism (RFLP) was used as a reference to screen the effective sites. Methods The genotypes of MTB clinical isolates collected from Beijing Haidian district were genotyped by using IS6110-RFLP, Spoligotyping and MLVA loci respectively. Three methods were compared with those of MLVA The type of effect. Results 86.7% of 45 MTB isolates belonged to Beijing family strains. The HGI (Hunter-Gaston Index) values ​​of Spoligotyping and Mycobacterium interpersed repetitive units (MIRU) -12 series were 0.4313 and 0.8700, 45 MTB strains were divided into 10 and 23 genotypes. The typing results of VNTR-9 series and IS6110-RFLP were consistent, with high HGI values ​​of 0.9980 and 45 strains of MTB divided into 43 genotypes. Conclusion Mycobacterium tuberculosis in Beijing showed a high prevalence in Haidian District, Beijing. VNTR-9 series MLVA is a simple and high-resolution typing method for the majority of infected families in Beijing in Beijing, and its resolution can reach the level of MTB genotyping, “gold standard” IS6110-RFLP .
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