【摘 要】
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目的探讨内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人肾透明细胞癌(ccRCC)细胞株786-O和ACHN中的表达及生物学功能。方法通过使用RNA干扰(RNAi)技术构建HHLA2稳定下调表达的人肾癌细胞株786-O和ACHN，通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验观察HHLA2下调表达对人肾癌细胞株生物学行为的影响；基因芯片分析探讨人肾癌细胞株中HHLA2敲低后的差异表达
【机 构】
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苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心 苏州大学细胞治疗研究院，常州 213003,苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心 江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心 苏州大学
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目的探讨内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人肾透明细胞癌(ccRCC)细胞株786-O和ACHN中的表达及生物学功能。
方法通过使用RNA干扰(RNAi)技术构建HHLA2稳定下调表达的人肾癌细胞株786-O和ACHN，通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验观察HHLA2下调表达对人肾癌细胞株生物学行为的影响；基因芯片分析探讨人肾癌细胞株中HHLA2敲低后的差异表达基因。
结果细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验结果显示，LV-HHLA2-sh1组和LV-HHLA2-sh2组中肾癌细胞系的细胞增殖能力较LV-NC组显著降低；划痕试验结果显示划痕48 h后，LV-HHLA2-sh1及LV-HHLA2-sh2组的无细胞区域显著宽于LV-NC组(LV-HHLA2-sh1：786-O：F＝99.340，P<0.01，ACHN：F＝113.5，P<0.01；LV-HHLA2-sh2：786-O：F＝35.32，P<0.01，ACHN：F＝26.47，P<0.01)；Transwell侵袭试验结果显示LV-HHLA2-sh1组和LV-HHLA2-sh2组中肾癌细胞系的细胞侵袭能力较LV-NC组显著降低；细胞周期检测结果显示HHLA2下调表达后细胞周期阻滞于G1期，同时细胞周期蛋白(Cyclin) D1、c-Myc和细胞周期蛋白E1表达减少，Cyclin D1表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低；c-Myc表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低；Cyclin E1表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低。此外，基因芯片检测结果显示，肾癌细胞系下调HHLA2表达后，上皮细胞-间充质转换标志物E-钙粘蛋白表达显著增加，N-钙粘蛋白和波形蛋白的表达显著降低。
结论HHLA2在人肾透明细胞癌细胞株786-O和ACHN中下调表达可显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
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