【摘 要】
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目的探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)调控连环蛋白(catenin)对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)形态的影响。方法构建鼠源的N-cadherin融合蛋白超表达载体,利用脂质体转染的方法将
【机 构】
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新乡医学院生命科学技术学院干细胞与生物治疗技术研究中心; 河南省医用组织再生重点实验室; 新乡医学院生物医学工程学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81600987,81771226);新乡医学院科研创新课题(YJSCX201601Z,2016PN-KFKT-03);新乡医学院博士科研启动基金(XYBSKYZZ201523);新乡医学院自然科学类重大科技成果培育计划(20172DCG-03);河南省科技厅资助项目(142300410192);河南省自然科学基金(162300410214);河南省教育厅资助项目(14B31
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目的探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)调控连环蛋白(catenin)对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)形态的影响。方法构建鼠源的N-cadherin融合蛋白超表达载体,利用脂质体转染的方法将空载体pCAG-MCS-EGFP和超表达载体pCAG-N-Cad-EGFP分别转染至N2a细胞,作为对照组和实验组;细胞划痕和黏附实验检测Ncadherin超表达对N2a细胞迁移和黏附的影响,免疫荧光检测N-cadherin超表达对N2a细胞形态的影响,并结合Western blotting检测连环蛋白家族的表达情况。结果与对照组相比,N-cadherin超表达促进细胞突起的形成,使得N2a细胞突起增多和伸长; N-cadherin超表达增强了黏附性而抑制了细胞的迁移能力; N-cadherin超表达使得细胞内连环蛋白家族中α-catenin、β-catenin和p120蛋白表达均显著上升(P <0. 05),而γ-catenin表达下降但差异不显著(P> 0. 05);另外,N-cadherin超表达的细胞有明显的聚集现象。结论 N-cadherin超表达促进N2a细胞突起形成,增强细胞的黏附性从而抑制细胞的迁移能力,调控连环蛋白家族成员的表达并促使细胞聚集。
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